Бакпосев мочи: как сдавать, правила сбора, подготовка к анализу

Как проводится бакпосев

Образец осадка мочи помещается на питательные среды, которые обеспечивают благоприятные условия для роста микробных колоний. Такой питательной средой может служить кровяной агар, сахарный бульон и другие растворы, разным возбудителям подходят разные среды. Чаще всего в лаборатории производится посев на несколько питательных сред. Главный критерий оценки патогенности микробов – их способность расти и размножаться, то есть образовывать колонии, поэтому концентрация бактерий в определенном объеме мочи определяется не количеством отдельных бактерий, а числом колониеобразующих единиц – КОЕ. Под колониеобразующей единицей подразумевается бактериальная клетка, из которой при посеве вырастает видимая колония микроорганизмов.

Если при посеве обнаруживают высокое количество бактерий (10 4 и более КОЕ/мл), проводится тест на антибиотикочувствительность. Он позволяет определить, какие антибактериальные средства наиболее эффективно останавливают рост колоний.

Он позволяет определить, какие антибактериальные средства наиболее эффективно останавливают рост колоний.

Для питания и дыхания нужны условия

Микробиологи нынче знают, что каждому возбудителю нужна своя «родная» среда с учетом ее рН, окислительно-восстановительных потенциалов, вязкости, влажности и осмотических свойств. Среды могут быть мягкими и твердыми, простыми и сложными, универсальными и не очень, однако во всех случаях они должны обеспечивать питание, дыхание, размножение и рост бактериальной клетки.

пример роста микроорганизмов после бак-посева в питательную среду

Некоторые среды (тиогликолевая, Сабуро) подходят для широкого круга микроорганизмов и называются универсальными. Другие же предназначены только для определенных видов, например, пневмококк и золотистый стафилококк, продуцирующие гемолизины, растут на кровяном агаре, который служит для выделения особо «капризных» и, вместе с тем, опасных штаммов. Таким образом, разновидностей сред множество, где каждая из них выращивает свой круг микроорганизмов.

Постоянными обитателями, не несущими никакой опасности человеку, то есть, нормальной микрофлорой организма, без которой мы просто жить не можем.

Посев мочи

При исследовании лаборант выявляет микроорганизмы и определяет их количество. Диагностическое значение равняется 104-105 КОЕ/мл. Если их концентрация превышает норму, то говорят о положительном результате, то есть бак посев плохой. Лечение в этом случае сводится к приему антибиотиков, которые наиболее чувствительны к высеянным микроорганизмам. При анализе бывают случаи, когда общий анализ хороший, человек не имеет жалоб, а бак посев показывает кишечную палочку. В этом случае, скорее всего, не были соблюдены стерильные условия. Поэтому сбор и проведение повторных исследований придется повторить.

Посев спермы.

Правила отбора материала для бак.посева

Способ отбора клинического материала для микробиологического исследования (бакпосева), сроки и условия его транспортировки очень существенно влияют на точность и достоверность результатов.

Общие правила отбора клинического материала для микробиологического исследования (бак посева).

За 7 сут. до взятия материала прекращают лечение антибиотиками (или антимикотиками – при микологическом анализе). Если проводится местное лечение, также прекращают медикаментозную обработку очага поражения.

В направлении необходимо указать вид и место взятия материала и отметить, какое микробиологическое исследование следует провести:

1. Бактериологический посев

2. Бактериологический посев + микроскопия мазка на микрофлору

3. Микологический посев (в т.ч. на скрытое миконосительство).

4. Бактериологический + микологический посевы (комплексное исследование, позволяющее получить наиболее информативные результаты).

Отбор клинического материала для бактериологического исследования.

Коллекторы (тупферы) (ватные тампоны-зонды + транспортная среда)
Контейнеры с крышками для клинического материала («банки для мочи»)
Предметные стекла (для мазков) (обезжиренные)
Флаконы с питательной средой Hemoline (для посева крови).

1. Кровь (посев на стерильность). Посев крови проводят непосредственно на месте сразу после взятия крови. Кровь для посева отбирают шприцем или системой для взятия крови (Vacuette), строго соблюдая правила асептики, в объеме 3-5 мл. После взятия кровь сразу же засевают через иглу во флаконы со специальной средой Hemoline через резиновую пробку флакона. Засеянный флакон направляют в лабораторию.

2. Моча. Собирают в стерильные контейнеры, среднюю порцию свободно выпущенной мочи, в количестве 3-5 мл, после тщательного туалета наружных половых органов. Также мочу можно отбирать методом цистоцентеза, через катетер (см. также Бакпосев мочи).

3. Мокроту, слюну, сперму, грудное молоко собирают также в стерильные контейнеры, не менее 1-2 мл, по возможности избегая контаминации материала извне.

4. Пунктаты, содержимое абсцессов, асцитную, синовиальную жидкость отбирают с соблюдением правил асептики шприцем, не менее 1-2 мл, и в шприце направляют в лабораторию.

5. Отделяемое слизистых, кожи, ран, глаз, ушей и т.д. собирают ватным тампоном-зондом, который сразу помещают в пробирку с транспортной средой. Если место отбора сухое (например кожа), тампон предварительно смачивают стерильной жидкостью (физ. раствор или вода для инъекций). При отборе материала из половых органов предварительно проводят их туалет.

6. Взятие мазка для микроскопии на микрофлору. Берут материал отдельным тампоном-зондом, наносят, растирая, на обезжиренное предметное стекло. С другой (чистой) стороны стекла стеклографом очерчивают область мазка. Номер мазка ставят на той же стороне стекла, где нанесен мазок. Мазок высушивают на воздухе ок. 10 мин, помещают в индивидуальный пакетик.

7. Взятие материала для микологического исследования (посев на грибы и актиномицеты). Метод взятия зависит от локализации поражения:

А) Если поражение находится на гладкой коже, в слуховом канале, межпальцевых пространствах, кожных складках и т.п., материал отбирают ватным тампоном-зондом (как и для бактериологического исследования), помещают в транспортную среду. Для комплексного исследования (микология+бактериология) в этом случае достаточно одного тампона.

Б) Если поражен шерстный покров, пинцетом отбирают волосы с периферии пораженного участка, извлекая их с корнем. Также пинцетом собирают корочки, чешуйки в достаточном количестве (малое количество материала снижает достоверность анализа!). Если поражение выражено слабо (незначительное шелушение), можно сделать неглубокий соскоб кожных чешуек. Пораженные участки когтей откусывают кусачками, можно дополнительно сделать соскоб с когтя. Материал помещают в контейнеры с крышкой («банки для мочи») или стерильные чашки Петри или делают конверты из чистой бумаги. Крайне нежелательно помещать материал в пробирки. Эппендорфа, в шприцы, между предметными стеклами и т.п. Если помимо микологического следует провести и бактериологический анализ, то дополнительно из очага отбирают материал ватным тампоном-зондом, помещают его в транспортную среду.

В) Для исследования на скрытое миконосительство грибов-дерматофитов делают счёсы шерстного покрова обеззараженной щёткой (лучше зубной), стараясь охватить всю поверхность тела. Как вариант, стерильной марлевой салфеткой (стандартной, 5х5 см) протирают кожный покров животного, салфетку направляют в лабораторию (в данном случае собирать шерсть не нужно, споры грибов остаются на марле).

Хранение материала. Собранный материал должен быть доставлен в лабораторию в течение 1 сут. (24 ч). Материал в транспортной среде и материал для микологического исследования при необходимости может храниться до 3-5 дней (однако выдача ответа задержится на это же время). Весь материал до отправки в лабораторию хранят при комнатной температуре (не в холодильнике!)

Материал помещают в контейнеры с крышкой банки для мочи или стерильные чашки Петри или делают конверты из чистой бумаги.

Расшифровка результатов

Моча сама по себе стерильна, и в ней отсутствуют какие-либо бактерии. В случае выявления в биоматериале вредоносных микроорганизмов врачи делают вывод об их попадании в мочу с половых органов. Этот результат расшифровывается как положительный. Но этот вовсе не означает наличие у пациента болезней мочеиспускательной системы.

Если при сдаче анализа выявили большое количество патогенных микроорганизмов (более 10 тыс. на 1 мл), диагностируют заболевание, которое называется бактериурией. Главным признаком этой патологии считается преобладание в моче какого-то одного вида бактерий.

Если было выявлено одновременно несколько разновидностей бактерий, то делается вывод, что заражение биоматериала произошло из-за инфекции на кожных покровах. Тогда доктор рекомендует осуществить повторную сдачу анализа, чтобы подтвердить или опровергнуть результат.

Выделяют такие степени бактериурии (в расчёт берется полученное в результате исследования значение):

10-10-2 – наблюдается попутное заражение во время забора биоматериала (условно нормальный результат);
103 – указывает на отсутствие в организме воспалительного процесса (норма);
104 – результат вызывает сомнения, требуется повторная сдача анализа;
105 – в организме присутствует воспаление.

105 в организме присутствует воспаление.

Что может выявить бакпосев

Возбудителем воспалительных процессов в мочеполовой системе может стать любой представитель следующих групп бактерий:

Нормальная микрофлора. Это симбионты − постоянные обитатели организма, не несущие угрозы, а наоборот, обеспечивающие определенные биохимические процессы.
Условно-патогенная флора. В данную группу входят бактерии, которые становятся опасны только под воздействием провоцирующих факторов: болезнь, стресс, переохлаждение, большое количество алкоголя. В качестве примера можно привести стафилококк. В малом количестве он обнаруживается у любого мужчины, но опасным становится только после активного деления и достижения определенного объема колонии. Если бакпосев спермы вывил стафилококк, то есть повод подозревать развитие цистита, уретрита, простатита, везикулита.
Патогенная флора. Представители данной группы в организме присутствовать не должны ни в каких количествах. Бакпосев спермы чаще всего выявляет возбудителей венерических заболеваний.

Для условно-патогенных микроорганизмов выделяют четыре степени обсеменения:

Малое количество, размножаются только в жидкой среде.
В плотной среде рост присутствует, но количество колоний не превышает 10.
В плотной среде наблюдается активный рост, численность колоний достигает сотни.
Разрастается более 100 колоний.

При 3 и 4 степени обсеменения бакпосев считается «плохим» − инфекционное воспаление присутствует, необходимо лечение. Первые две степени обычно констатируются при неправильном сборе спермы.

Заключение к бакпосеву выглядит следующим образом:

На первом месте стоит латинское название бактерии, например, Escherichia coli. Это палочка, являющаяся естественным обитателем кишечника, но при попадании в урогенитальный тракт нередко размножается и провоцирует воспаление.
На втором месте указана концентрация. Количество обнаруженных патогенов исчисляется в колониеобразующих единицах на 1 мл спермы (КОЕ/мл). КОЕ – это базовая клетка, с которой начинается образование колонии.
Далее указывается тип обнаруженной бактерии – условно-патогенная или патогенная флора.

Для определения чувствительности обнаруженной бактерии к антибиотикам существует несколько обозначений:

S (susceptible) – высокая чувствительность. Микроорганизм реагирует на конкретный препарат.
I (intermediate) – относительная чувствительность (промежуточная резистентность). Означает, что назначить препарат для лечения данного типа бактерии можно, но придется увеличить дозу.
R (resistant) – устойчивость. Применять препарат для лечения бессмысленно.

Уровни обсемененности для большинства определяемых в сперме микроорганизмов: низкий 10^2, средний 10^3 – 10^4, высокий >10^4 (КОЕ/мл).

Образец заключения представлен ниже:

Выдержка из заключения к бакпосеву биоматериала

Тест на чувствительность на антибиотики не выполняется в следующих случаях: если бакпосев показывает рост колоний флоры, которая свойственна данной локализации, или КОЕ незначительно (низкий титр, ниже референсного значения).

I intermediate относительная чувствительность промежуточная резистентность.

Полезные советы: как правильно собрать мочу на бакпосев

Каждый пациент поликлиники рано или поздно сдает ряд анализов для контроля за состоянием здоровья. Бакпосев является одним из самых распространенных анализов, результаты которого зависят от множества факторов. Чтобы получить более точную картину, необходимо знать, как собрать мочу на бакпосев.

Чтобы получить более точную картину, необходимо знать, как собрать мочу на бакпосев.

Что показывает исследование

При помощи такого лабораторного исследования можно выявить следующие недуги:

сальмонеллез. Заболевание, при котором вредоносные микроорганизмы поражают тонкий отдел кишечника. Пациенты, страдающие от сальмонеллеза, сталкиваются с такими же симптомами, которые характерны для выраженной интоксикации. Сальмонеллез особенно опасен для детей, поскольку он нередко приводит к развитию сепсиса, воспаления легких и менингоэнцефалита. Инфицирование заболеванием происходит при игнорировании правил личной гигиеной, потреблении немытых овощей и фруктов;
дизентерия. Заболевание развивается под действием возбудителя шигелла и поражает преимущественно толстый отдел кишечника и желудок. Проникновение возбудителя также возможно только через немытые продукты;
коли-инфекции. В эту группу входят заболевания, продуцируемые кишечными палочками. Чаще всего инфекциями этого типа страдают дети дошкольного возраста. Заражение возможно только при контактировании здорового человека с носителем. И также дети могут заразиться, если родители не соблюдают правила санитарно-гигиенических норм.

Чтобы бакпосев кала показал достоверный результат, к нему нужно правильно подготовиться.

Техника (методика) бакпосева

Квалифицированное бактериологическое исследование (бак посев) позволяет оценить весь состав аэробной и микроаэрофильной микрофлоры в исследуемом материале. Каковы методики проведения этого лабораторного анализа? Они могут варьировать в зависимости от цели диагностического исследования, исследуемого материала, подозрения на тот или иной возбудитель.

Следует отличать бак.посев от других видов бактериологического исследования, в частности от микроскопии мазка. Задача микроскопии – визуально обнаружить клетки микроорганизмов в исследуемом материале (мазке). Задача посева – получить колонии возбудителя на питательных средах, и тем самым обнаружить его. Микроскопия – экспресс-метод, позволяет довольно быстро получить результаты. Однако точность этого метода (чувствительность) гораздо ниже, чем бак.посева. Микроскопия позволяет лишь примерно определить тип возбудителя – кокки, палочки, дрожжи. Бак. посев в свою очередь позволяет точно определить вид микроорганизма, его количество, и чувствительность к лекарственным препаратам.

Итак, для проведения бак.посева прежде всего необходимо грамотно отобрать клинический материал для исследования (подробнее см. Правила отбора патматериала для микробиологического исследования). Если патологический процесс идет на коже, слизистых, делают мазок материала ватным тампоном. Обычно используют коммерческие «свобы» (тампоны-зонды), которую помещают в пробирку с транспортной средой. В таком виде материал может храниться несколько суток. Если тампон помещается в сухую пробирку, то он должен быть происследован в тот же день.

Содержимое абсцессов, папул, везикул и т.д. отбирают обычно шприцем, соблюдая правила асептики. Жидкий материал (мочу, сперму, грудное молоко и т.д.) отбирают в стерильные контейнеры с резьбовой крышкой. Такой материал должен быть доставлен для исследования в лабораторию в тот же день, его хранение не допускается. Пересылка материала для бак посева должна осуществляться в термоизолированных сумках.

В бактериологической лаборатории проводят посев клинического материала на питательные среды, после чего посевы инкубируют в определенных условиях. Важно, чтобы использовались качественные стандартизованные питательные среды, предпочтительно известных производителей. В различных диагностических лабораториях используют различные алгоритмы посева. Оптимально, когда материал высевают на набор различных сред, обеспечивающих рост всех групп патогенных микроорганизмов. Обычно используют специальные дифференциально-диагностические среды, на которых опытный микробиолог практически сразу может определить вид возбудителя, и дополнительные тесты уже не нужны. Хотя такие среды довольно дороги, они позволяют существенно сократить время исследования. Если вид микроорганизма таким образом определить не удается, проводят его идентификацию с помощью дополнительных биохимических тестов.

Условия выращивания бактериологических посевов также играют большую роль. Должна поддерживаться оптимальная температура; определенные микроорганизмы требовательны к содержанию углекислого газа, а некоторые нуждаются в анаэробных (безкислородных) условиях. Все эти факторы должны учитываться специалистами лаборатории.

Когда выращивание посевов закончено, определяют вид выделенных микроорганизмов, и подсчитывают количество выросших колоний. Это дает представление о количественном содержании микроба в клиническом материале, что имеет определенное диагностическое значение.

Следующий этап бактериологического исследования – определение чувствительности обнаруженных бактерий к антибиотикам и фагам («определение АЧ», «подтитровка АЧ»). Обычно в материале обнаруживается не один, а несколько видов микроорганизмов, и у каждого из них чувствительность должна определяться индивдуально.

Чувствительность к антибиотикам обычно определяют диско-диффузионным методом. На поверхность питательной среды вносят взвесь микробных клеток, а сверху помещают диски, пропитанные антибиотиками. Посевы выращивают, и затем учитывают зоны подавления роста микроба вокруг дисков. Измеряют диаметр этих зон, и в зависимости от этого относят микроорганизм к одной из трех групп – чувствительный, устойчивый, промежуточный.

Наборы антибиотиков, к которым определяется чувствительность, варьируют у разных лабораторий. Обычно используют разные наборы для разных групп микроорганизмов – грамположительных и грамотрицательных. Помимо этого, у выделенных стафилококков определяют метициллинрезистентность (выявление МРС), наличие которой свидетельствует о резистентности ко всем бета-лактамным антибиотикам. У грамотрицательных микроорганизмов (родов Escherichia, Klebsiella, Pseudomonas и др.) выявляют наличие БЛРС (бета-лактамаз расширенного спектра), что свидетельствует о резистентности ко всем пенициллинам и цефалоспоринам I-IV поколений. Все эти сведения указываются в ответе лаборатории.

Следует отметить, что обнаружение того или иного микроба не всегда говорит о его этиологической роли. Хотя бак.посев является ценнейшим диагностическим методом, диагноз должен ставиться на основании комплекса анамнестических и диагностических данных.

Диагностика грибковых возбудителей (т.н. «бакпосев на грибы») отличается от бактериологической диагностики (подробнее см. Посев на грибы – микологическое исследование). Микологическое исследование направлено на выявление всего спектра клинически значимых грибов, дрожжей и актиномицетов, и включает микроскопию патматериала на наличие элементов грибов, посев на селективные питательные среды для выделения всего спектра клинически значимых грибов и актиномицетов, определение чувствительности грибов к антимикотикам. Ответ выдаётся как правило на 14 день, однако посевы выращиваются до 21 дня для выделения медленнорастущих грибов.

Наибольшей диагностической ценностью обладает комплексное микробиологическое исследование, объединяющие бактериологический и микологический анализы. Несколько лет назад исследования были узконаправленными. Например, отдельно сдавали «анализ на бак.посев», «анализ на лишай», «анализ на кандиду» и т.д. Зачастую пациентам приходилось сдавать все вышеперечисленные анализы по очереди, пока какой-нибудь из них не оказывался действительно полезным.

В результате такого исследования врач и пациент получают наиболее полное представление о микробной флоре пациента, а также о средствах терапии – у выделенных микроорганизмов определяется чувствительность к антибиотикам (антмикотикам) и бактериофагам. Это наиболее достоверный и информативный метод микробиологического исследования, который позволяет назначить оптимальное лечение. Заменить такое исследование пока не могут даже самые современные методы вроде ПЦР.

Таким образом, время, затраченное на комплексное микробиологическое исследование, полностью себя оправдывает.

В бактериологической лаборатории проводят посев клинического материала на питательные среды, после чего посевы инкубируют в определенных условиях.

Техника (методика) бакпосева

Ответ выдаётся как правило на 14 день, однако посевы выращиваются до 21 дня для выделения медленнорастущих грибов.

Бактериологическое исследование

Бактериологическое исследование – способ проверки биоматериала на наличие

возбудителя инфекционного заболевания. Метод бакпосева позволяет выявить и идентифицировать патогенный микроорганизм даже при относительно малых его концентрациях в тканях. Для этого исследуемые образцы высевают на питательные среды и культивируют для получения визуально видимых колоний возбудителя. Полученные штаммы бактерий типируют и проверяют на устойчивость к антибиотикам.

На заметку! Бактериологические методы исследования уступают по точности иммуноферментному анализу (ИФА) и полимеразной цепной реакции (ПЦР), но в отличие от них, с высокой точностью определяют степень чувствительности выделенных штаммов бактерий к группам антибиотиков. Полученный результат позволяет подобрать максимально эффективное лечение и скорректировать дозы лекарств.

Процедура занимает несколько суток (48-72 часа).

Метод бакпосева позволяет выявить и идентифицировать патогенный микроорганизм даже при относительно малых его концентрациях в тканях.

Подготовка к исследованию

Чтобы результаты исследования были достоверными, нужно правильно осуществить сбор мочи. Рекомендуется производить забор мочи утром, после пробуждения. Прежде всего, нужно провести туалет наружных половых органов без использования мыла, интимных гелей и прочих антисептических средств. Затем следует промокнуть промежность чистым полотенцем. Во время менструации медики рекомендуют женщинам использовать тампоны при собирании мочи для анализа.

Чтобы предотвратить искажение результатов, посуда, используемая для хранения мочи, должна быть стерильна. В советское время человеку перед исследованием нужно было идти в лечебное учреждение, где ему выдавали стерильную баночку. К счастью, сейчас все намного проще: достаточно зайти в ближайшую аптеку и приобрести контейнер для мочи.

Для бактериального исследования необходимо собрать в емкость среднюю порцию мочи. Это значит, что первая порция мочи спускается в унитаз, затем необходимо задержать мочеиспускание, поднести емкость и наполнить мочой. Заполненный контейнер можно закрыть крышкой и отставить в сторону. Заключительную порцию мочи нужно слить в унитаз.

Важно: нельзя прикасаться к внутренней поверхности контейнера пальцами. Этого можно избежать, если держать емкость непосредственно у основания.

На качество результата бак посева влияет и своевременность проведения исследования. Поэтому мочу нужно принести в лабораторию в течение двух-трех часов.

Заполненный контейнер можно закрыть крышкой и отставить в сторону.

Информация для окулистов

В педиатрическом флаконе отрицательное давление соответствует объёму 3-5 мл.

Сроки готовности бактериологического посева

При исследовании слизи из носоглотки результат будет готов через 5-7 дней, исследование испражнений займет около 4-7 дней. При обследовании соскоба урогенитального тракта длительность исследования займет 7 дней. Посев на общую флору длится 4-7 дней. Больше всего по длительности готовится кровь на стерильность – 10 дней. Однако самый ранний предварительный результат могут дать через 3 дня.