ПЦР диагностика на гепатит: как расшифровать, таблица

Основы диагностики заболевания

Диагностика гепатита B основывается на оценке клинических проявлений, иммуноферментных и инструментальных методов исследований. Заболевание протекает в острой фазе после инкубационного периода и, в зависимости от дозы инфекции и эффективности лечения, переходит в хроническую стадию. Главной целью лечения остается предотвращение хронизации, то есть элиминация всех вирусных частиц из крови. Клиническая норма течения болезни — излечение без последующей виремии.

Факт устранения инфекции необходимо доказать количественным методом исследования.

Поскольку любой качественный иммуноферментный анализ позволяет диагностировать HBV косвенно, то есть не показывают наличие возбудителя во внутренней среде организма, а характеризует иммунный ответ на инфекцию, то контроль эффективности терапии и факт излечения становится труднодоказуемыми. Потому пациенту с гепатитом B или с наличием диагностических критериев в его пользу должна проводиться полимеразная цепная реакция с целью количественного определения числа вирусных частиц в крови. Диагностическая норма — это отсутствие копий ДНК инфекта.

Значимость результата числа вирусных частиц, полученного метода ПЦР, превышает значение иммуноферментных исследований.

Как подготовиться и сдавать кровь

В течение дня у человека меняется соотношение эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, а также активность некоторых гормонов. Прием пищи влияет на наличие жирных кислот в крови. Этот фактор мешает точности анализа. По этим причинам анализ ПЦР на гепатит С проводится утром натощак. В качестве исследуемого образца берется кровь из вены.

Перед сдачей анализа требуется подготовка:

  1. за 2-3 дня – ограничить нагрузку на печень (исключить алкогольные напитки, не употреблять жирную и жареную пищу);
  2. за сутки – исключить стресс, поднятие тяжестей, посещение спортзала и бассейна;
  3. за 8 часов – прекратить употребление любой пищи, так как глюкоза, жиры, минералы, попадающие в кровь, изменяют качество ферментной реакции;
  4. с утра до момента сдачи крови – не курить.

На результат анализа может повлиять повышение концентрации адреналина в крови. Чтобы исключить эту погрешность, нужно прийти на 20 минут раньше, отдышаться и успокоиться.

На эффективность анализа крови могут влиять разные препараты – БАДы, средства с кофеином, этанолом, глюкозой, леводопой, пероральные контрацептивы, антибиотики. Даже если человек принимает обычные витамины, об этом нужно предупредить врача.

Как подготовиться и сдавать кровь.

Расшифровка количественного анализа на гепатит С

Обычно, когда пациент получает на руки результаты анализов, в бланке приведены показатели нормы, полученные значения и краткая интерпретация. Однако расшифровка анализа крови на гепатит С должна проводиться только врачом. Количественная ПЦР – один из этапов диагностики, поэтому врач сопоставляет приведенные цифры с полученными ранее результатами.

В зависимости от полученных показателей определяется степень вирусной нагрузки или полное отсутствие РНК HCV в организме.

Если проведен количественный анализ на гепатит С, расшифровка проводится в соответствии с таблицей:

Значение показателяУровень вирусной нагрузки
РНК вирус не обнаружены (либо количество копий меньше чувствительности тест-системы)Норма, человек здоров либо анализ проведен в инкубационный период патологии
1,8×102–7,9×105 МЕ/млНизкая вирусная нагрузка. Указывает на недавнее инфицирование, латентное течение либо эффективность противовирусных препаратов
8×102–2,3×107 МЕ/млУмеренная вирусная нагрузка. Обычно отмечается при хронической форме HCV. Прогноз лечения благоприятный при условии соблюдения рекомендаций врача
2,4×107 МЕ/мл и вышеВысокая виремия. Очень вероятны тяжелые осложнения (вплоть до рака печени)

Чтобы точно расшифровать анализ и не допустить ошибочных результатов, оценивать данные количественной ПЦР можно только после выявления серологических маркеров качественной ПЦР. При ИФА обязательно указывается коэффициент позитивности. Также принимают во внимание данные ультразвукового обследования, эластографии и биопсии, если исследование проводилось.

если невозможно прервать прием каких-либо медикаментов, сообщить названия принимаемых лекарств лаборанту и врачу, который будет интерпретировать полученные данные.

Количественное определение РНК вируса гепатита С (HCV) методом ПЦР

Гепатит С часто протекает скрыто, без очевидных клинических проявлений. Чтобы определить наличие вируса в организме и поражение им печени требуется пройти соответствующее исследование — ПЦР количественный на гепатит С.

Читайте также:  Симптомы анафилактического шока у детей

О чем я узнаю? Содержание статьи.

О чем я узнаю.

Виды: качественный, количественный и генотипирование

При первичной диагностике гепатита С серологическим методом определяется титр вырабатываемых антител. Такой результат приблизительно показывает активность патологического процесса. Но максимально точную информацию доктор может получить только после изучения данных ПЦР.

В настоящее время практически во всех лабораториях анализ выполняют ультрачувствительным методом. Таким образом диагностика HCV возможно уже через 10–14 дней после заражения, реже – спустя 2,5–3 недели. В зависимости от целей, преследуемых в ходе исследования, доктор назначает конкретный тип теста.

Существуют следующие разновидности ПЦР:

  1. Качественный. При назначении диагностических тестов, у пациентов возникает вопрос, что показывает подобный метод исследования. Качественный анализ способом ПЦР – высокочувствительный тест, определяющий наличие РНК вируса в крови в минимальной концентрации. Обычно подобная разновидность полимеразной цепной реакции ставится по технологии обратной транскрипции. Это один из немногих способов ПЦР, в ходе которого в качестве мишени можно использовать РНК.
  2. Количественный. Количественный анализ на гепатит С позволяет определить точный уровень РНК HCV в крови. Проведение исследования возможно только одним способом – методом real-time. В ходе подготовки материала к постановке ПЦР в образец добавляют краситель. После каждого цикла амплификации проводится автоматизированное количественное исследование в режиме реального времени. Нередко методику проводят в сочетании с обратной транскрипцией. Таким образом возможно качественное определение малого количества копий РНК вируса. Устанавливать уровень РНК HCV количественно имеет смысл, если получен положительный результат качественной ПЦР.
  3. Генотипирование. Анализ сдается проводится на конечной стадии диагностического процесса. Принцип исследования построен на разнице в последовательности нуклеотидов, что отличает один генотип вируса гепатита С от другого. Обычно анализ делают методом мультипраймерной (мультиплексной) ПЦР.

При подозрении на носительство вируса, необходимо выполнить качественную ПЦР. Если результат отрицательный, человек скорее всего здоров. Но для полного исключения заражения рекомендуют повторить исследование через 7–10 дней. Если же РНК вируса обнаружена, проводят дальнейшие тесты (количественный и генотипирование).

общий анализ крови и мочи;.

Виды ПЦР на гепатит В и расшифровка результатов

Полимеразная цепная реакция — это вид анализа крови, который позволяет безошибочно выявлять вирус гепатита В. Особенностью метода является то, что он способен показать ВГВ на ранних стадиях — уже через месяц после инфицирования, в то время как специфический антиген у больного обнаруживается только через 2 месяца. ПЦР может выявить не только обычный ДНК-вирус, но и мутантные штаммы, которые ни один другой анализ увидеть не позволяет.

При расшифровке ПЦР на гепатит В результаты сравниваются со стандартными значениями. На основе этого делаются выводы о наличии заболевания (положительный результат), концентрации вируса (активности) или отсутствии недуга (отрицательный результат). Обработка данных идет 2 недели.

При расшифровке ПЦР на гепатит В результаты сравниваются со стандартными значениями.

ПЦР на гепатит С

ПЦР (или полимеразная цепная реакция) — это введенный Кэри Муллисом (США) лабораторный способ диагностики ДНК и РНК возбудителя. Достаточно всего одной молекулы, обнаруженной в коже или биологической жидкости, чтобы высокочувствительный ПЦР-анализ выявил вирус-возбудитель.

При меньшей концентрации вируса анализ может дать ложноотрицательный результат.

Количественный

Количественный анализ подразумевает несколько вариантов результатов. Для удобства ознакомления представим их в виде таблицы.

РезультатРасшифровка
ОтрицательноЭто норма для здорового человека. Значит, в исследуемом биологическом материале нет РНК вирусного гепатита, либо содержание меньше порогов восприимчивости.
До 1,8*10^2 МЕ/млГоворит о том, что содержание РНК меньше диапазона количественного определения. Интерпретировать такой результат надо осторожно, потому что он считается спорным. Дополнительно проводятся другие исследования для последующего сопоставления. Также проводят повторно ПЦР-тест.
До 8*10^5 МЕ/млНизкая вирусная нагрузка. Как правило, такой результат значит, что проводимое лечение эффективно.
От 8*10^5 МЕ/млВысокая вирусная нагрузка. Незамедлительно требуется терапия (если не проводится), либо необходима коррекция медикаментозных назначений.
2,4*10^7 МЕ/млРНК больше верхнего максимума количественного определения. На фоне такого результата о вирусной нагрузке не судят. Требуется повторное исследование с разведением образца биологической жидкости.

Требуется повторное исследование с разведением образца биологической жидкости.

ПЦР анализ на гепатит B

ПЦР анализ на гепатит B (В) производится для обнаружения инфекции (ДНК НВV).

Читайте также:  Зачатие ребенка: правила

Концентрацию ДНК ВГВ измеряют в копий/мл или me/мл. В оценке результатов исследования ориентируются на следующие показатели:

  • 2х10^6 – в девяноста пяти процентах случаев станет хроническим.

уточняется стадия заболевания острая, хроническая ;.

Таблица. Расшифровка анализы

Анализы на антитела при гепатите В

Положительный (встречается у здоровых людей)

Положительный (хроническая и острая формы)

Положительный (формирование иммунитет к болезни)

Положительный (обострение, хроническая форма)

Положительный (образование иммунитета)

Положительный (хорошее протекание болезни)

Вирус не обнаружен, низкий уровень генного материала, курс лечения на основе биопсии клеток печени, сильное поражение клеток печени и нарушение ее функционирования

Биохимический анализ крови

Мужчины: до 40-41 МЕ/л

Женщины: 34-35 МЕ/л

Непрямой – не больше 17 мкмоль/л

Прямой – до 4.3 мкмоль/л

Всего – не больше 20.5 мкмоль/л

От 35 до 50 г / л

Взрослые от 65 до 84 г/л

Мужчины: 10-71 ед/л

Женщины: 6-42 ед/л

Кроме того, ложную информацию могут показать анализы, которые не были выполнены по всем правилам.

Как выполняют подсчет вирионов

Во время количественной ПЦР возбудителя идентифицируют путем обнаружения РНК в плазме крови. Это возможно за счет удвоения участка нуклеиновой кислоты вируса в среде фермента РНК-полимеразы. Во время анализа копируются (амплифицируются) только определенные участки генома.

Подсчет количества РНК вируса гепатита осуществляют в 3 этапа:

  1. Выделение генетического материала. Чтобы очистить вирусную РНК от крови и белковых включений, биоматериал пропускают через сорбенты, отмывают в растворе, центрифугируют, а потом обезвоживают. В результате остается осадок с вирусными частицами, который растворяют в специальной жидкости. На выходе получается РНК вируса гепатита в элюенте.
  2. Амплификация. Анализ выполняется в приборе-термостате, в котором периодически подогревают и охлаждают пробирки. При одном исследовании делают до 35 циклов, состоящих из 3 фаз: денатурация (разрушение) РНК, отжиг и синтез нуклеиновых кислот матричной цепи. За несколько десятков циклов в пробирке образуется множество фрагментов РНК, достаточное для подсчета количества генетического материала.
  3. Электрофорез. Пробирку с копиями вируса гепатита помещают в агарозный гель. Образец подключают к источнику тока, под действием которого фрагменты РНК разделяются. Благодаря электрофорезу копии нуклеиновых кислот становятся различимыми в свете ультрафиолета. Затем с применением специального оборудования подсчитывают количество РНК вируса.

В настоящее время для определения уровня виремии все чаще проводят ПЦР-диагностику в реальном времени (Real-Time PCR). В отличие от стандартного анализа, в образец крови вводят раствор с флуоресцентными метками. Благодаря этому удается подсчитать количество амплифицированной РНК ВГС в реальном времени после каждого цикла.

Если качественный ПЦР дал ответ не обнаружено , то для последующего лечения важно узнать порог чувствительности реагента.

Анализ ПЦР гепатита С (РНК гепатита С)

Для контроля вирусологического ответа при проведении противовирусной терапии желательно использовать диагностическую систему с чувствительностью не ниже 50 МЕ мл.

В каких случаях требуется диагностика гепатовируса?

В первую очередь диагностические меры применяются к пациентам, у которых наблюдаются следующие симптомы:

  • Тошнота и рвота;
  • Болевые ощущения в области печени;
  • Осветление (обесцвечивание) фекальных масс и потемнение мочи;
  • Желтушный оттенок склер и кожных покровов;
  • Общее недомогание, имеющее сходство с гриппозными проявлениями;
  • Апатичное или депрессивное состояние.

Однако, ввиду бессимптомного течения хронической формы вирусных гепатитов, сдавать анализы рекомендуется и в ряде профилактических мер.

Регулярно сдавать кровь на мониторинг патогена рекомендуется:

  • Лицам, ухаживающим за инфицированными;
  • Медперсоналу, регулярно контактирующему с зараженной кровью и другими биологическими жидкостями;
  • Пациентам, регулярно проходящим процедуру диализа и переливания крови;
  • Инъекционным наркоманам;
  • Больным, страдающих от ВИЧ-инфекции;
  • Лицам, ведущим беспорядочную половую жизнь.
Читайте также:  Как убрать целлюлит на попе

Важно вовремя определить наличие гепатовируса в крови больного. Чем раньше будет диагностирована болезнь, тем быстрее ее удастся победить при помощи инновационных противовирусных препаратов.

Пациентам, регулярно проходящим процедуру диализа и переливания крови;.

Расшифровка анализа

Качественный ПЦР анализ имеет два ответа:

  • отрицательный;
  • положительный.

ПЦР отрицательный означает, что возбудитель в образцах крови не обнаружен.
Положительный ответ свидетельствует об обратном: обнаружены РНК того или иного генотипа вируса С.

Вероятность достоверности результата равна 95%. Остальные 5% — это ошибка по вине человека. Такая возможность допускается из-за высоких требований к проведению исследования:

  • правил хранения реактивов;
  • соответствующей квалификации медперсонала;
  • чистоты биоматериала.

Сам набор ПЦР имеет 100% диагностическую точность.

Количественный ПЦР РНК гепатита С позволяет определить вирусную нагрузку на организм больного. С его помощью:

  • уточняется стадия заболевания (острая, хроническая);
  • определяется эффективность противовирусного лечения;
  • выясняется необходимость биопсии печени.

В некоторых случаях больной не ощущает никаких признаков болезни, в то время как методом ПЦР установлено инфицирование ВГС. Это означает, что заболевание находится на ранней стадии развития либо в хронической форме. Для уточнения диагноза необходимы дополнительные исследования, для скорейшего начала противовирусного лечения.

Остальные 5 это ошибка по вине человека.

Общие сведения о гепатитах

Термин «гепатит» можно охарактеризовать как собирательный. Заболевание, имеющее инфекционную природу, вызывается вирусами различных видов, которые передаются человеку такими путями, как:

  • фекально-оральный (острый вирусный гепатит А, ВГЕ);
  • парентеральный (ВГВ и ВГС);
  • вертикальный (от матери к ее плоду — ВГВ и ВГС);
  • трансплацентарный (ВГВ и ВГС).

Гепатит В – одна из парентеральных форм, провоцирующая негативные последствия для печени (цирроз, рак). При отсутствии своевременного лечения заболевание часто переходит в хроническую форму. Механизм передачи инфекции предполагает факт попадания биологических жидкостей больного человека в кровь здорового. Произойти это может во время незащищенных половых контактов, при проведении медикаментозных процедур без должного дезинфекционного режима, использовании общей иглы с больным при инъекциях наркосредств.

Гепатит А – народное название «желтуха», «болезнь Боткина» — заболевание кишечного характера. Возбудитель попадает в организм с загрязненными продуктами, через общие с больным предметы быта, инфицированные его выделениями. Имея меньший, чем парентеральные гепатиты инкубационный период (30-45 дней против полугода), ВГА дает реальную возможность выявить источник инфекции, а также больных в начальной форме заболевания среди контактных.

Гепатит С – заболевание, вызываемое вирусом HCV. Путь передачи – аналогичен ВГВ. Агрессивная и плохо поддающаяся коррекции форма болезни. По мнению многих специалистов, эффективного лечения запущенных форм не существует.

Гепатит Е – результат воздействия HEV. Особенность – высокий уровень вовлечения в процесс почек. Передается инфекция фекально-оральным путем. Особенно опасна для беременных в последнем триместре. Вероятность излечения от вируса высока, даже самопроизвольно.

Виды анализов крови на маркеры.

Рейтинг
( Пока оценок нет )
Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: